Производство Рекомбинантных белков Гст на L1, Е6 и Е7 ВПЧ 16-тег для использования в Luminex assay для обнаружения антител туниских женского населения Висконсин

Производство Рекомбинантных белков Гст и L1, Е6 и Е7 ВПЧ 16-тег используется в анализа Luminex для обнаружения антител туниских женского населения по

Природного нефрита: форма и украшение Джейд современных

Производство Рекомбинантных белков Гст и L1, Е6 и Е7 ВПЧ 16-тег используется в анализа Luminex для обнаружения антител туниских женского населения по Wi — бусины цепи

Производство рекомбинантных белков ГСТ и L1, Е6 и Е7 ВПЧ 16-тег используется в анализа LUMINEX для обнаружения антител туниских женского населения от рака шейки матки и управления

Ашур. М*А, Бен Юнес. Ра, Кахла. Са, Kochbati. ЛБ Zeghal. Постоянного Тока, Maalej. Мб, Зуари. , Oueslati ФК. Ра

а — лаборатории экологической Иммуно-микробиология и канцерогенезе (блок ІМЕС) факультет естественных наук Бизерте Zarzouna 7021 Тунис.
б — службу Института Радиотерапии рака Салах Azeiz Тунис.
с — служба акушерства — гинекологии Центр материнства и Neonatalogy больницы Ла Рабта Тунис.

*Автор
Ашур Монгия
Е-mail: mahaachour2000@yahoo.fr
Тел.: 216 72 591 845
Факс: 216 72 590 566

Аннотация:

Определенные типы вируса папилломы человека (ВПЧ), в основном ВПЧ 16 и 18 были признаны в качестве основных этиологических факторов развития рака шейки матки. Антитела против антигенов ВПЧ были найдены, чтобы быть связаны с шейки матки развитие рака. Разные анализы могут быть использованы для обнаружения антител, но они имеют низкий уровень чувствительности и специфичности. В настоящей работе мы заинтересованы в том, чтобы подготовить рекомбинантных белков для использования в технологии LUMINEX для того, чтобы пройти серологические исследования в Тунисском женского населения. Так, ВПЧ типов 16 и L1, Е6 и Е7 последовательности слиты с их 3′-конец последовательности кодирования терминал undecapeptide для большого SV40 Т-антигена (тег) были изолированы от плазмид и вставлен в вектор pGEX для выражения ГСТ синтеза белков в E. coli. Кодирование последовательностей для L1tag, E6tag и E7tag ВПЧ 16 соответственно были мобилизованы путем сбраживания ферментами и сшивают в переваривается вниз по течению плазмид домена ГСТ. В плазмиду выражение для тега ГСТ был построен путем включения кодирования фрагмент для тега эпитоп. Клетки е. coli БЛ 21 были преобразованы с плазмиды pGEX и вырос в среде Лурия Бертани, содержащей ампициллин. Рекомбинантная экспрессия белков индуцировали добавлением изопропил 0.25 -? мм-Д-тио-galactoside (IPTG) до среднего. Бактерии были собраны после индукции и гранулированные бактерии снова суспендируют в фосфатно-солевом буферном растворе (ФСБР) и лизису с использованием высокого гомогенизатора давления. Затем лизаты очищали центрифугированием.
Белки были проверены миграции в додецилсульфатом натрия (ДСН) методом электрофореза в геле. Данные показали, что они были стабильными для обнаружения и эти лизаты были сохранены при -20°C для использования в Luminex для выявления антител в женском Тунисского населения. Этот анализ показал, что серо — позитивности по отношению к различным антигенам отличается на обследованной группы и различий между больными и контрольной были статистически значимыми (p<0.001). Кроме того, повышенный процент позитивности встретился на Е7 (61 %) против 44 % и только 21 % для Е6 и антигенов Л1 соответственно и интенсивность иммунного ответа с выработкой антител к конце антиген L1 и ранние антигены Е6 и Е7 были разные.

Ключевые слова: бирка ГСТ — Е коли — ВПЧ 16 – Л1 — Е6 — Е7 – LUMINEX

Введение:
На глобальном уровне, вирус папилломы человека (ВПЧ), по оценкам, причиной почти полмиллиона случаев и более 270 000 случаев смерти от рака шейки матки, что соответствует более 2,5 млн потерянных лет жизни ежегодно (ПГЖ) (Сью и соавт,. 2007).
Тип ВПЧ 16 (и в меньшей степени ВПЧ Тип 18) связан с более редкими формами рака, а именно рак вульвы, влагалища, пениса, ануса, ротоглотки и гортани. Эффективные профилактические вакцины были разработаны…

КОММЕНТАРИИ